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在實(shí)驗(yàn)中ELISA試劑盒常見問題的詳解
更新時(shí)間:2019-06-05   點(diǎn)擊次數(shù):1639次

臨界值質(zhì)控血清
質(zhì)控制血清分定值和未定值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值,一般定在正常值與異常值交界點(diǎn)上,定性測定時(shí)處于弱陽性水平,稱為臨界值。乙肝標(biāo)志物臨界值的擬定,應(yīng)按臨床要求,為臨床供給統(tǒng)一的判斷弱陽性的規(guī)范。 
臨界值質(zhì)控血清能夠作為試劑盒中的陽性對(duì)照品和陰性對(duì)照品以外的第三個(gè)對(duì)照品,它能夠活絡(luò)地反映出試劑盒的檢出水平,確保弱陽性反響的標(biāo)本不漏檢。
質(zhì)控血清的制備
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室能夠依據(jù)自己的條件,選用臨床中心供給的質(zhì)控血清,或按以下辦法自己制備本室運(yùn)用的質(zhì)控血清(以乙肝質(zhì)控血清為例)。
1) 搜集新鮮的無溶血、無黃疸、無細(xì)菌污染的陽性血清。
2) 56℃加熱10小時(shí)來活。
3) 離心或過濾除掉沉積。
4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將搜集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好,因其成份更接近于檢測標(biāo)本。
5) 抽濾除菌。按一次運(yùn)用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存?zhèn)溆?。不可重?fù)凍融。
被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。如果該實(shí)驗(yàn)還有其它要求,則應(yīng)加所要求濃度的質(zhì)控物。
6) 標(biāo)定含量。20-30次測定成果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,并與已知定值血清對(duì)比測定。
質(zhì)控血清的運(yùn)用
衛(wèi)生部臨床查驗(yàn)中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,能夠在-20℃堅(jiān)持半年定值不變。冰凍狀況融化運(yùn)用時(shí),應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜重復(fù)冰融或自行分裝。開展某項(xiàng)查驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個(gè)月用量預(yù)備??思旱牟欢ㄖ蒂|(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需預(yù)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能安穩(wěn),較長期內(nèi)效價(jià)不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與患者樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測效果。

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